PRUEBAS CRUZADAS

Introducción.

Las pruebas cruzadas son aquellas pruebas que determinan la compatibilidad sanguínea en una transfusión.

Esta prueba esta dividida  en prueba mayor y prueba menor, y constan de tres fases

·         Fase salina

·         Fase de albumina

·         Fase del suero de Coombs

☆ En la prueba mayor se mezclan 2 gotas de la suspensión de eritrocitos al 5% del donador con  dos gotas del suero del receptor.

☆ En la prueba menor se mezcla dos gotas del suero del donador con dos gotas de la suspensión al 5% de eritrocitos del receptor.

》Fase salina se realiza las suspensiones al 5% de eritrocitos del donador y receptor.

Se empiezan a realizar las pruebas mayor y menor. En esta fase no se elimina el potencial z (conjunto de cargas negativas que rodean a un hematíe)de los eritrocitos.

》Fase de albumina- la albumina al 22% elimina el potencial z de los eritrocitos esto permitiendo que la aproximación de los eritrocitos uno con otro sea mayor

》Fase del suero de Coombs-en esta fase se confirma si el suero o paquete globular del donador es apto para la transfusión.

Fundamento:

el objetivo de las pruebas cruzadas de compatibilidad, es investigar anticuerpos específicos activos a 37 grados centígrados en el suero del paciente  contra los eritrocitos del donador y viceversa.

Material:

Sangre en tubo tapón color amarillo

Tubos de ensayo

Pipeta Pasteur

Solución salina fisiológica

Gradilla

Albumina bovina al 22%

Suero de Coombs

Incubadora

Centrifuga

Procedimiento:

Ø  Se toman muestras de sangre con tubos tapón amarillo

Ø  Se dejan coagular y se meten a centrifugar a 5000 r.p.m durante 5 minutos

Ø  Se retira el suero y el gel

Ø  Se agrega media pipeta Pasteur en  cada tubo al vació y se mezcla

Ø  Se hacen dos lavados de eritrocitos al 5% (uno del donante y uno del receptor)

Ø  En la prueba mayor se agrega 2 gotas del suero del receptor y dos de la suspensión de eritrocitos al 5% del donante en un tubo de ensayo

Ø  En la prueba menor se agrega dos gotas del suero del donante y  dos gotas de la suspensión de eritrocitos del receptor

Ø  Se dejan incubar durante 10 min.

Ø  Se meten a centrifugar a 1500 r.p.m durante 1 min

Ø  Se agita el tubo y se observa si el botón se fragmenta

Ø  Si se homogeniza la sangre con el suero se agrega dos gotas de albumina al 22% y se mete a incubar 10 min

Ø  Se mete a centrifugar a 1500 r.p.m durante 1 min.

Ø  Se agita el tubo y observamos si se homogeniza

Ø  Si se homogeniza se agrega dos gotas del suero de Coombs y se mete a incubar 10 min

Ø  Se mete a centrifugar 1500 r.p.m durante 1 min

Ø  Agitamos el tubo y observamos si se homogeniza

Si en la PRUEBA MAYOR hay aglutinamiento en algunos de los pasos anteriores esto indica que el paquete globular no puede ser transfundido ya que puede causar reacciones postransfusionales, si sale negativo en todas los pasos indica que el paquete globular puede ser transfundido.

si en la PRUEBA MENOR aglutina en alguno de los pasos anteriores esto indica que el suero no es apto para transfundir ya que podría causar alguna reacción postransfusional, pero si no hay aglutinaciones ningún paso esto indica que el suero es apto para transfundir.