HEMOGLOBINA

Introducción:

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos.

La hemoglobina también transporta el dióxido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de producción de energía, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire. El análisis de la hemoglobina se realiza normalmente en un estudio completo de hematimetría, con el recuento de glóbulos rojos o hematíes.

Las concentraciones de hemoglobina están influidas por variaciones fisiológicas como la edad, sexo, deshidratación, postura y altitud, y por procesos patológicos. Se encuentran valores patológicos en anemias y en policitemias. La determinación de la concentración de hemoglobina se ha convertido en una de las pruebas mas importantes en el diagnóstico y tratamiento de la anemia. Las tres causas principales de anemia son: Alteración en la síntesis de los eritrocitos en la medula ósea, pérdidas de sangre excesivas y transporte alterado de eritrocitos hacia sangre periférica.

Fundamento:

Este método tiene como fundamento la transformación previa de la hemoglobina en cianmetahemoglobina que es muy estable y posee un color característico cuya absorbancia a 540 nm puede ser cuantificada comparándola con la de varias soluciones de concentraciones conocidas de hemoglobina preparadas a partir del patrón de referencia.

Objetivo:

Determinar cuántos gr de hemoglobina (Hb) hay en toda la sangre circulante, para tener un diagnóstico clínico ya que se pueden variar diversas enfermedades debido a un valor normal de hemoglobina.

Material:

Espectofotometro

Tubos de 12 x 100 mm

Sangre venosa

Pipetas volumétricas de 5 ml

Pipetas automáticas

Procedimiento:

Ø  Conectar el espectofotometro.

Ø  Homogeneizar bien la sangre.

Ø  Pipetear con propipeta 5 ml de reactivo de Drabkin en un tubo ensayo limpio.

Ø  Mediante la propipeta añadir 20ul de sangre homogeneizada al tubo que contiene 5 ml de reactivo de Drabkin.

Ø  Agitar el tubo mediante inversión 4 o 5 veces con el fin de conseguir homogeneizar bien la mezcla sangre-reactivo y esperar 5 min para que se produzca la hemolisis total.

Ø  Leer la A de la solución a 540 nm, utilizando agua destilada como blanco.