Introducción.
Las pruebas cruzadas son aquellas pruebas
que determinan la compatibilidad sanguínea en una transfusión.
Esta prueba esta dividida en
prueba mayor y prueba menor, y constan de tres fases
·
Fase salina
·
Fase de albumina
·
Fase del suero de Coombs
☆ En la prueba mayor se mezclan 2 gotas de
la suspensión de eritrocitos al 5% del donador con dos gotas del suero del receptor.
☆ En la prueba menor se mezcla dos gotas
del suero del donador con dos gotas de la suspensión al 5% de eritrocitos del
receptor.
》Fase salina se realiza
las suspensiones al 5% de eritrocitos del donador y receptor.
Se empiezan a realizar las pruebas mayor y
menor. En esta fase no se elimina el potencial z (conjunto de cargas negativas
que rodean a un hematíe)de los eritrocitos.
》Fase de albumina- la
albumina al 22% elimina el potencial z de los eritrocitos esto permitiendo que
la aproximación de los eritrocitos uno con otro sea mayor
》Fase del suero de
Coombs-en esta fase se confirma si el suero o paquete globular del donador es apto
para la transfusión.
Fundamento:
el objetivo de las pruebas cruzadas de
compatibilidad, es investigar anticuerpos específicos activos a 37 grados centígrados
en el suero del paciente contra los
eritrocitos del donador y viceversa.
Material:
Sangre en tubo tapón color amarillo
Tubos de ensayo
Pipeta Pasteur
Solución salina fisiológica
Gradilla
Albumina bovina al 22%
Suero de Coombs
Incubadora
Centrifuga
Procedimiento:
Ø Se toman muestras de sangre con tubos tapón amarillo
Ø Se dejan coagular y se meten a centrifugar a 5000 r.p.m durante 5
minutos
Ø Se retira el suero y el gel
Ø Se agrega media pipeta Pasteur en
cada tubo al vació y se mezcla
Ø Se hacen dos lavados de eritrocitos al 5% (uno del donante y uno del
receptor)
Ø En la prueba mayor se agrega 2 gotas del suero del receptor y
dos de la suspensión de eritrocitos al 5% del donante en un tubo de ensayo
Ø En la prueba menor se agrega dos gotas del suero del donante
y dos gotas de la suspensión de
eritrocitos del receptor
Ø Se dejan incubar durante 10 min.
Ø Se meten a centrifugar a 1500 r.p.m durante 1 min
Ø Se agita el tubo y se observa si el botón se fragmenta
Ø Si se homogeniza la sangre con el suero se agrega dos gotas de albumina
al 22% y se mete a incubar 10 min
Ø Se mete a centrifugar a 1500 r.p.m durante 1 min.
Ø Se agita el tubo y observamos si se homogeniza
Ø Si se homogeniza se agrega dos gotas del suero de Coombs y se mete a
incubar 10 min
Ø Se mete a centrifugar 1500 r.p.m durante 1 min
Ø Agitamos el tubo y observamos si se homogeniza
Si
en la PRUEBA MAYOR hay aglutinamiento en algunos de los pasos anteriores esto
indica que el paquete globular no puede ser transfundido ya que puede causar
reacciones postransfusionales, si sale negativo en todas los pasos indica que
el paquete globular puede ser transfundido.
si
en la PRUEBA MENOR aglutina en alguno de los pasos anteriores esto indica que
el suero no es apto para transfundir ya que podría causar alguna reacción postransfusional,
pero si no hay aglutinaciones ningún paso esto indica que el suero es apto para
transfundir.
